【摘要】
目的 探讨蟾酥注射液对H22腹水型肝癌小鼠肿瘤抑制作用的作用机理。方法 将60只昆明种小鼠随机分为3组。蟾酥注射液组(治疗1组)：每次注射蟾酥注射液1.5 mL/只；环磷酰胺组(治疗2组)：注射环磷酰胺0.5 mg/只(用生理盐水组稀释)；生理盐水组(对照组)：注射生理盐水0.5 mL/只。每组20只。各组均隔5 d注射1次,共给药3次。每组中取10只最后1次注射后5 d,采集血液,检测肿瘤坏死因子；另10只记录小鼠存活情况。结果 蟾酥注射液能不同程度延长腹水型肝癌小鼠的生存期,能使肿瘤坏死因子水平明显下降,与对照组比较,P＜0.01,治疗组之间比较,P＜0.05。结论 蟾酥注射液对H22腹水型肝癌小鼠肿瘤有抑制作用,能够延长生存期。

【关键词】  蟾酥注射液；腹水型肝癌；生存周期；小鼠

Influence of Secretio Bufonis Injection on Mean Survival Time and Carcinostatic Activities in Mice Bearing Intraperitoneal H22 Tumor

JIN Jun, ZHANG Ming-xi, FU Lu-di

1.Nanhai Municipal Hospital of TCM, Foshan 528200, China；2.Animal Center of Guangzhou University of TCM, Guangzhou 510405, China

Abstract：Objective To investigate the mechanism of Secretio bufonis injection on the carcinostatic activities in mice bearing intraperitoneal H22 tumor. Methods Secretio bufonis injection (1.5 mL) was injected into the abdomind cavity of mice once 5 d for 3 times. Cyclophosphamide (0.5 mg/0.5 mL) was injected into other groups. NS (0.5 mL) was injected into control groups. Each group were 20 mice. TNF and survival time of mice were observed. Results Mean survival times of mice bearing intraperitoneal H22 tumor were (28.2±5.8)d for Secretio bufonis group, (27.9±9.7)d for Cyclophosphamide group, (20.7±4.2)d for control group. The content of TNF in mice bearing intraperitoneal H22 tumor were 2.53±0.14 for Secretio bufonis group, 3.02±0.14 for Cyclophosphamide group, 3.32±0.2 for control group. The survival times of mice bearing intraperitoneal H22 tumor were prolonged in the groups of Secretio bufonis (P<0.01) and Cyclophosphamide (P<0.05). The content of TNF were significantly inhibited in the groups of Secretio bufonis (P<0.01). Conclusion Secretio bufonis injection can inhibit the tumor and prolong the survival time of mice bearing intraperitoneal H22 tumor.

Key words：Secretio bufonis injection；bearing intraperitoneal H22 tumor；survival time；mice
 
蟾酥为蟾蜍科动物中华大蟾蜍或黑眶蟾蜍的皮肤腺及耳后腺分泌的白色浆液干燥物。味甘辛,性温,有解毒、消肿、止痛作用。可治疗疮、痈疽发背、瘰疬、慢性骨髓炎、咽喉肿痛、小儿疳积、心衰、风虫牙痛等。有关蟾酥抗炎、抗感染以及抗癌的实验与临床研究文献上已见报道[1-3]。为了进一步探讨蟾酥抗癌的作用机理,我们将蟾酥注射液接种于H22腹水型肝癌瘤株的昆明种小鼠,观察其生存周期、肿瘤坏死因子变化,并设环磷酰胺及生理盐水组对比。现将结果报道如下。

1  实验材料

1.1  动物

昆明种小鼠,体重18～22 g,鼠龄80～100 d,雌雄不限,广州中医药大学实验动物中心提供,动物合格证号：0010387,动物实验设施合格证号：0009285。

1.2  药物

蟾酥注射液,安徽凤阳科苑药业有限公司生产；注射用环磷酰胺由江苏恒瑞医药股份有限公司生产；生理盐水由神州制药有限公司生产。

1.3  仪器及试剂

放免γ测量仪由上海日环核仪器厂生产(型号：SN659B)；肿瘤坏死因子试剂盒由中国人民解放军总医院科技开发中心放免所提供。

1.4  瘤株

H22腹水型肝癌,广州中医药大学肿瘤研究所提供。

1.5  接种

无菌条件下取带瘤小鼠肿瘤细胞,1∶4稀释,以0.2 mL/只接种于小鼠腹腔。

2  实验方法

2.1  分组与给药

昆明种小鼠60只,随机分为蟾酥注射液组(治疗1组)、环磷酰胺组(治疗2组)和生理盐水组(对照组),每组20只。接种24 h后,给小鼠腹腔注射药物。治疗1组：蟾酥注射液每次1.5 mL/只；治疗2组：环磷酰胺用生理盐水稀释,使每只小鼠每次的注射量为0.5 mL中含0.5 mg的环磷酰胺；对照组：生理盐水每次0.5 mL/只。3组均隔5 d注射1次,共给药3次。最后1次注射后5 d,每组各取10只采集血液,另10只观察生存周期。

2.2  肿瘤坏死因子的测定

取全血100 μL,以1 000 r/min离心5 min,取血清,加入TNF试剂,放免γ测量仪检测。

2.3  统计学方法

采用SPSS11.5软件进行统计学处理,结果以x±s表示,用T检验判断用药组与对照组间的差异。

3  结果

(见表1、表2)表1  蟾酥注射液对荷瘤小鼠生存周期的影响(略)注：与对照组比较,*P<0.05,**P<0.01；与治疗2组比较,#P<0.05(下同)。表2  蟾酥注射液对荷瘤小鼠肿瘤坏死因子的影响(略)

4  讨论
   
实验结果表明,蟾酥注射液对H22腹水型肝癌小鼠生存期有延长作用。环磷酰胺是已知的抗肿瘤药物,它能抑制肿瘤细胞的繁殖,通过控制肿瘤的生长来延长生存期,与蟾酥注射液相比虽无明显差异,但蟾酥注射液效果更优。

本实验结果显示,用药组血清肿瘤坏死因子水平低于对照组,且以蟾酥注射液更明显。肿瘤坏死因子在肿瘤患者血清中明显增高,并与肿瘤恶性程度、临床分期呈正相关。
   
综上,蟾酥注射液对H22腹水型肝癌小鼠肿瘤有抑制作用,其效果较环磷酰胺更优。