——丙型肝炎病毒：病毒学，诊断和治疗
注：丙型肝炎直接作用药物是近年来发展最迅速，取得最明显临床效果的新药类型。因为它的类型疗效与病毒生命周期，病毒核酸，蛋白结构有关！
摘要
二十年以上研究已提供丙型肝炎病毒(HCV)生命周期，包括病毒RNA和蛋白的一般性质更好了解。这个努力促进敏感诊断工具和有效抗病毒治疗的发展。目前，建议对高风险组中个体进行血清学筛选测试和建议核酸测试确证活动性HCV感染。HCV RNAs的定量和分型对确定抗-病毒最适治疗时间和预测反应可能性很重要。在2000s早期，聚乙二醇化干扰素加利巴韦林[ribavirin]称为标准抗-HCV治疗。但是，这个治疗不理想。至2014年，波普瑞韦[boceprevir]，特拉匹韦[telaprevir]，simeprevir，索非布韦[sofosbuvir]和Harvoni被美国食品和药品监管局批准为HCV感染的治疗。在最近几年可能得到新完全-口服，无干扰素，全-基因型抗-HCV治疗。有患者期望被治愈。因此，一个有效的预防性疫苗将是对HCV感染斗争下一个挑战。
关键词：丙型肝炎病毒；诊断；治疗；肝细胞肝癌；核酸测试；酶免疫分析；干扰素；直接作用抗病毒药；宿主靶向药；索非布韦
引言
丙型肝炎病毒(HCV)约占急性肝炎病例15%-20%。急性感染后，大约50％至80％的HCV患者将发生慢性感染。大约，世界范围HCV感染170百万个体(http://www.who.int)。慢性丙型肝炎(CHC)患者是处于高风险发生危及生命合并症，包括20%病例硬化和在硬化患者肝细胞肝癌(HCC)在年发生率4%-5%。
流行病学研究还表明HCV是伴随若干肝外表现包括胰岛素耐药性，2型糖尿病，肾小球病，口腔表现，等。HCV-被感染患者大多数将发生慢性肝炎，但他们的约15%-40% 可能自发清除。
对HCV感染不同的结局负责因子是什么?
病毒演变动力学和宿主遗传多态性，如，白介素28B (IL28B)基因，在决定HCV感染结局是重要的。
HCV的发现后，报道分离株中核苷酸很大多样性。由于病毒RNA-依赖RNA聚合酶(HCV NS5B蛋白)容易出错，一个密切相关但HCV被感染患者内产生不同群被称为准种[quasispecies]病毒变种。来自单个被感染的患者HCV核苷酸序列中有1%-5% 变异。在病毒中核苷酸取代的积蓄已导致多样化至不同亚型和甚至基因型。因此，HCV RNA基因组序列是高度异质性。目前，HCV被分类至11个基因型(被指定为1-11)它们的核苷酸序列不同至30%-50%，它们的6种是主要的(基因型1至6)。
HCV基因型内，几种亚型(被指定为a，b，c，等)可被它们的15%-30%不同核苷酸序列被定义。HCV基因型和亚型的患病率在地理上是不同的.
目前，基因型1 是全球最普遍(46%)，接着是基因型3，基因型2和基因型4。各种基因型有不同的感染性和致病性，从而影响进展为肝硬化的比率和HCC的风险。HCV异质性还将导致对抗-病毒治疗不同的反应，如，基因型1和4是对基于干扰素治疗比基因型 2和3是更耐药性。因此，HCV异质性提出了对全-基因型抗病毒治疗开发的挑战。此外，HCV异质性对所有HCV基因型成功疫苗发展的障碍。当然，HCV异质性也可能影响病毒诊断。
虽然一致性，不同的HCV基因型保存在细胞内生命周期的相似性。本综述简要描述HCV生命周期和的一般性质病毒RNA和蛋白，它与病毒感染的诊断和抗-病毒治疗的开发发展相关。本总之还总结了检测和治疗HCV感染当前方法。.
病毒学
HCV生命周期
HCV是一个小包膜RNA病毒属于家族Flaviviridae和属hepacivirus。HCV基因组RNA是有正性极性单链，它被核心蛋白包装和被脂质双分子层含两个病毒糖蛋白(E1和E2)形成病毒颗粒包裹。虽基因型中核苷酸序列差异，所有当前公认HCV基因型是嗜肝和致病。随病毒颗粒附着至肝细胞上特异性受体开始HCV生命周期。迄今，高密度脂蛋白受体清道夫受体B类Ⅰ型，四旋蛋白CD81，紧密连接蛋白-1，和封闭蛋白是已知细胞受体起始HCV感染的附着步骤。被建议病毒，结合至其受体复合物后，被内化，和核衣壳被释放到细胞质。然后该病毒脱壳游离其基因组RNA，和HCV基因组RNA被用于在细胞浆内为多聚蛋白翻译和复制。HCV复制发生在含病毒非-结构蛋白和细胞蛋白“复制复合物”。HCV复制是被NS5B蛋白催化。但是，其他病毒非结构蛋白也重要。NS3蛋白的NTP酶/解旋酶结构域有对病毒复制几种重要功能，包括 RNA被刺激NTP酶活性，RNA 结合，和广泛二级结构的RNA区解旋[unwinding]。NS4B启动支持HCV复制复制复合物的形成。NS5A蛋白在病毒复制中也起重要调节作用。新直接作用抗病毒药 (DAAs)，特别是被设计抑制NS5B RNA依赖RNA聚合酶现成为可得到。在临床研究中几种其它较新DAAs(如，对NS5A蛋白抑制剂)也显示鼓舞人有前途.
HCV复制涉及对HCV复制需要的许多细胞因子，例如，亲环素[cyclophilin]A，通过其相互作用与NS5A和NS5B，和microRNA-122，通过与HCV基因组的5’非翻译区(5’UTR)结合它帮助HCV复制。因此，宿主因子也可能成为对抗-HCV治疗潜在靶点。目前，至少两个靶向宿主药物(HTAs) 已达到临床开发，包括亲环素A的特异性抑制剂和microRNA-122的拮抗剂。

图1 丙型肝炎病毒多聚蛋白共-和转录后地被宿主和病毒蛋白酶处置成至少10种不同的蛋白，被排列成以下顺序NH2-C-E1-E2-p7-NS2-NS3-NS4A-NS4B-NS5A-NS5B-COOH。为在C-E1，E1-E2，E2-p7,和p7-NS2连接点裂解需要宿主信号肽酶。NS2裂解NS2和NS3间位点；NS3/4A丝氨酸蛋白酶裂解在NS3-NS4A，NS4A-NS4B，NS4B-NS5A处位点，和NS5A-NS5B连接点。几种新DAAs(如，波普瑞韦，simeprevir，和特拉匹韦)特异性地被设计抑制NS3/4A蛋白酶现已成为可得到。波浪形线标记丙型肝炎病毒基因组RNA未翻译区域(UTR)而长方形代表来自长开放阅读框[long open reading frame]多聚蛋白。感染性HCV颗粒的生产中涉及非常低密度脂蛋白合成/分泌机械。HCV使用这个脂蛋白生物合成通路生产成熟病毒颗粒和出口。
HCV RNA和蛋白一般性质
病毒基因组RNA：HCV基因组RNA含三个不同区域：
(1)一个5′UTR或非编码区；
(2) 一个长超过9000核苷酸(nt)开放阅读框(ORF)；和(3) 一个短3′ UTR。
HCV 5’UTR含341 nt 位于ORF翻译起始密码子的上游。5’UTR含内部核糖体进入位点它通过直接与40S核糖体亚单位结合形成稳定启动前复合物为HCV多聚蛋白翻译。
长ORF编码一个约3000氨基酸多聚蛋白，将被宿主和病毒蛋白酶进一步处理。
3’UTR是主要地涉及HCV复制期间负链引发[minus-strand priming]。
核苷酸序列变异性分布遍及整个病毒基因组。5’UTR是基因组中最保守区编码包膜蛋白(E1，E2) 是最变异的一个。因此，高度保守的5’UTR区是为HCV基因组检测跨越不同的基因型寻常选择的靶点(在“诊断” 节).
病毒蛋白：长ORF编码一个多聚蛋白它被加工共-和转录后地被宿主和病毒蛋白酶至至少10不同的蛋白，被排列成以下顺序NH2-C-E1-E2-p7-NS2-NS3-NS4A-NS4B-NS5A-NS5B-COOH。为在C-E1，E1-E2，E2-p7，和p7-NS2连接点裂解需要宿主信号肽酶。为HCV核心蛋白进一步成熟也需要宿主信号肽肽酶。在HCV非结构蛋白加工涉及两种病毒蛋白酶：NS2，一种锌-依赖金属蛋白酶裂解NS2和NS3间；和NS3/4A，一种丝氨酸蛋白酶裂解NS3-NS4A，NS4A-NS4B，NS4BNS5A，和NS5A-NS5B连接点间(图1)。这些病毒蛋白保留伴随加工后细胞内膜。
核心，一个191-氨基酸多肽，是一个高度保守的碱性蛋白它包装其RNA基因组形成病毒核衣壳。在肝癌发生和脂肪变性可能涉及核心蛋白[33]。备用阅读框架蛋白(ARFP)/核心+1/F(frameshift)蛋白在核心-编码区内一个-2/+1核糖体移码[ribosomal frameshift]的结果生成。仍不知道在HCV生命周期中ARFP/核心+1/F蛋白的作用。两个包膜糖蛋白，E1(33-35 kDa)和E2(70-72 kDa)，组装为非共价异源二聚体和为病毒进入所需。不像HCV核心蛋白，E2含高变异区有氨基酸序列不同的HCV分离株间不同至80%。因此，进行酶免疫分析(EIA)检测HCV核心抗原而不是包膜蛋白以代表病毒颗粒数(在“诊断”节)。
p7，一个63-氨基酸多肽，形成离子通道在病毒感染具有重要的作用。NS2，一个21-23 kDa跨膜蛋白，病毒复制周期的完成中必不可少。NS2蛋白来自三或四个跨膜螺旋插入到内质网(ER) 高度疏水性N-端残基形成而NS2蛋白的C-端结构域一个在NS2/3自动蛋白酶活性与NS3的N-端结构域在一起起重要的作用。NS3，一个67 kDa多肽，具有多功能活性。NS3的N端有丝氨酸蛋白酶活性和其C-端有NTP酶/解旋酶活性。NS3蛋白是通过与NS4A蛋白相互作用与ER膜结合。NS3的酶活性NTP酶/解旋酶活性是对病毒RNA复制是不可缺少的。NS4A，一个54-氨基酸多肽，对NS3蛋白是一个辅助因子。NS4A和NS3蛋白间相互作用稳定化和促进其蛋白酶活性。NS3/4A蛋白酶对病毒非结构蛋白的裂解是必不可少的，因此，对抗-HCV治疗它是选择的靶点。现在得到几种新DAAs特异性地被设计抑制NS3/4A蛋白酶[21,28,34](图1)。对NS5A的磷酸化也需要NS4A和可直接地与NS5A相互作用。NS4B，一个小疏水性27 kDa蛋白，招募其他病毒非-结构蛋白形成复制复合物。NS5A，一个56-58 kDa亲水性磷蛋白，在病毒复制也重要虽然其确切作用不清楚。NS5B，一个65 kDa蛋白，是一个RNA-依赖RNA聚合酶(RdRP) 负责新基因组RNAs的合成。作为HCV复制复合物一个核心组成部分，NS5B已成为对抗病毒治疗一个主要靶点(图2)。
 

图2 丙型肝炎病毒NS5B作用如同RNA-依赖RNA聚合酶和在新RNA基因组的合成中起重要作用。作为丙型肝炎病毒复制复合物的中心组分，NS5B已出现作为对抗病毒治疗主要靶点。新直接作用抗病毒药，特别是被设计抑制NS5B线正在成为可得到(如，索非布韦)。
超过二十年的研究已提供HCV生命周期更好理解，包括病毒RNA和蛋白的性质。这个努力促进对于HCV感染敏感诊断工具和有效抗病毒治疗发展。
诊断
病毒感染诊断的目的是允许被感染人被确定和治疗。因此，病毒感染的诊断对预防疾病进展和病毒播散很重要。原发性HCV-被感染患者的多数是无症状的，因此，症状可能不被用作对HCV感染特异性指标。不管一个正常谷丙转氨酶(ALT)水平HCV病毒血症可能仍存在。因此，病毒学方法而不是ALT水平是被用以诊断HCV感染。一般说来，为检查病毒感染病毒学方法包括间接和直接测试。间接测试是检测病毒感染诱发的抗体，包括IgM对最近感染和IgG对最近或过去感染，直接测试包括病毒分离，病毒抗原和病毒核酸的检测。
目前，很难利用临床标本分离和培养HCV。此外，不仅在50%-93%有急性丙型肝炎患者可检测到而且在50%-70%的CH患者抗-HCV IgMs。因此，抗-HCVIgM不能被用作对急性HCV感染可靠标记物，和在临床实践中未曾使用IgM分析。目前，在临床实践中对抗-HCV诊断分析使用总抗体，病毒核心抗原，和病毒基因组(图3).
抗体生成的检测
一般说来，血清学测试为检测抗-HCV抗体包括为筛选和确证的测试。筛选检验被首先使用筛选抗体阳性标本而然后验证性测试被用于证明阳性筛选样品.
筛选检验：EIA：目前，在诊断实验室为抗-HCV抗体检测常用EIA的第三代检验。
这些检验中检测抗-HCV抗体所用的保守抗原来自HCV核心，NS3，NS4和NS5区。发现在有慢性肝病患者中第三代EIAs的灵敏度估计是98.9%和特异性100%。EIAs易于使用和价格低廉。此外，该测定可以完全自动化和适用于大批量测试。因此，EIAs检测抗-HCV抗体被一般地推荐为筛选HCV感染。但是，这个分析不应在婴儿小于18个月使用由于与母体抗体反应可能性。可得到几个美国食品和药品监管局(FDA)-批准基于抗体-分析。但是，利用第三代HCV的EIAs感染和可检测到抗体的出现间的时间(血清学窗口阶段)是一般地查过40天。在2008年，第四代EIA已成为可得到，它能检测到检测抗-HCV抗体显著地比其它分析更早(www.microgenbioproducts.com)。在第四代抗-HCV分析所利用抗原衍生自核心(两个不同的抗原表位簇群)，NS3，NS4A，NS4B，以及NS5A区。NS3和NS4抗原是衍生自基因型1a，1b，2和3。
筛选检验：迅速，床旁检测[point-of-care test]:
床旁检测是直接地在患者护理地点处使用，诊断实验室外。曾开发几种床旁检测(POCTs)检测抗-HCV抗体有一个相对地高灵敏度和特异性。在2010年被FDA 当前批准的测试是OraQuick HCV Rapid抗体测试(OraSure Technologies，Bethlehem，PA)。它被批准在15岁以上患者中使用，对筛选人被考虑处于对HCV感染风险。这个测试检验在不同的样品中抗-HCV抗体，如，指尖和静脉穿刺全血，血清，血浆，或口腔液。核心的NS3和NS4抗原重组蛋白或合成肽，被固定在一个硝酸纤维素膜上进行一个间接横向流动免疫分析，和结果利用胶体金标记蛋白A被直接地可视化，在样品中存在抗-HCV抗体在20至40分钟内生成一个红紫色线。这些迅速测试是适于为资源-有限情况因为它们价格便宜，易于执行和快速。

图3分析检测抗-丙型肝炎病毒抗体，病毒核心抗原，和病毒基因组 RNA被在临床实践中用于诊断HCV感染。HCV：丙型肝炎病毒；POCT：床旁检测；EIA：酶免仪分析；RIBA：重组免疫印迹分析；RT-PCR：逆转录-聚合酶链锁反应；TMA：转录介导的扩增；bDNA：分支DNA.
验证性检验：重组免疫印迹分析：对通过EIAs已显示阳性反应性个体重组免疫印迹分析(RIBA)可被用于确证抗-HCV抗体的存在。这个分析是高度特异性，因为一个膜条上各条带评估几种HCV蛋白的各个抗体的存在。INNO-LIA™ HCV评分(Fujirebio Europe，以前Innogenetics)分析可被自动化。这个分析包括重组蛋白和合成肽来自E2 高度可变区，NS3解螺旋酶，NS4A，NS4B和NS5A区。由于抗- HCV EIAs的高灵敏度和特异性，在诊断实验室为确证不再需要RIBA。此外，核酸测试为病毒RNA而不是RIBA被用作对HCV感染验证性测试。HCV感染可以容易地利用当前可得到的第三代EIAs检测。此外，POCTs的使用可增加HCV筛选机会。但是，这些间接病毒学测试检测抗- HCV抗体不能区分当前与过去感染。活动性HCV感染必须通过直接诊断方法证实。
病毒RNA的检测
根据为扩增所用项目，核酸扩增测试(NAT)被分为目标扩增，信号扩增和探针扩增方法。目标扩增方法[如，逆转录-聚合酶链锁反应(RT-PCR)和转录介导的扩增(TMA)]和信号扩增方法 [如，分支DNA(bDNA)]被常用于检测HCV RNA的存在。在血清中HCV RNA的存在是病毒血症的一个可靠标记物。通用的标准化对HCV RNA滴度是重要的。世界卫生组织(WHO) 以建立一个轨迹标准对HCV RNA定量单位，即，一个HCV RNA国际单位(IU)，它被用于所有商业HCV RNA 定量分析无论使用什么技术.
定性HCV RNA检测：定性检测分析是根据目标扩增的原理利用或 RT-PCR或TMA，可得到几种FDA-批准的定性分析为HCV RNA47]。抽提HCV RNA和用逆转录酶转化为互补DNA (cDNA)。随后cDNA被加工通过环酶反应导致生成大数量双链DNAs在基于PCR分析或在基于PCR分析中或TMA检测中单链。这些扩增产物产物的检测是通过杂交产生扩增子到特异性探针实现。一般说来，为HCV诊断高度保守的5’UTR区是选择的目标HCV感染间接抗体检测产生POCT EIA RIBA 跨越不同的基因型抗-HCV基因组RNA检测。
定量HCV RNA检验：借助于目标扩增技术(实时RT-PCR或TMA)或信号扩增技术(bDNA分析)可定量HCV RNA，也可得到几种被FDA批准定量分析检测HCV RNA。在临床实践中实时RT-PCR是为定量HCV RNA水平选择的方法。这个分析是高度灵敏有宽广定量动力学范围和可以防止携带污染。
在美国自2007年已可得到完全自动化HCV NAT分析，和在2010年发出对HCV NAT分析有关要求指导原则  (http://www.fda.govQBiologicsBloodVaccinesQGuidance-ComplianceRegulatoryInformation/Guidances/default.htm)。但是，需要记住不是所有HCV基因型是等同地被NAT分析检测，大多数可能因为之前发生核苷酸失匹配。
在血清中HCV RNA或许是急性HCV感染最早可检测到的标记物，在抗-HCV抗体出现前几周。CHC感染被定义为存在HCV RNA超过6个月。在CHC患者中HCV RNA水平保留相对地稳定随时间推移。因此，通过抗-HCV抗体测试被筛选阳性反应后，往往使用NATs检测HCV RNA作为验证性工具诊断CHC感染。HCV RNA的检测还被用作抗病毒治疗前和期间测定病毒负荷(www.who.int)。另一方面，HCV RNA水平没有预后价值。HCV基因组RNA的水平，反映HCV的复制，与肝病严重程度没有相关，与肝病发展到硬化或肝癌风险无关。
病毒核心抗原的检测
与其它诊断方法像EIA比较，NATs的优点是有较高特异性和灵敏度。但是，这些方法的缺点是花费时间和需要先进的技术设备，训练有素的技术人员，专门的实验室空间和昂贵的试剂。在有HCV感染患者中，曽被证实对各种基因型HCV核心抗原水平与HCV RNA水平强烈相关。因此，由于价廉的益于进行，HCV核心抗原定量分析可以被用作对NATs检测HCV RNA另一种方法。
目前，核心抗原检测 借助于化学发光微粒免疫分析可被完全自动化在Architect HCV核心抗原测试(Abbott Laboratories)Architect HCV 抗原分析有一个特异性100%，有一个较低检测低限fmol/L相当于约1000 IU/mL的HCV RNA。而当前HCV RNA分析有一个较低水平的检测5-15 IU/mL间。
一般说来，约90%的HCV RNA阳性样品是有一个病毒负荷阳性10000 IU/mL以上，已在e HCV核心抗原分析的灵敏度范围。因此，HCV抗原检测可能是阳性抗体筛选检验后的下一步。已发展为检测抗-HCV抗体和HCV核心抗原几种联合分析。
目前，EIA检测HCV核心抗原在血库情况下和按照当前临床实践指导原则在治疗监测替代 NATs检测HCV RNA是灵敏度太低。但是，在资源有限情况下可用作补充测试。Architect HCV 抗原分析曽提示所有-口服，无干扰素抗病毒治疗不需要高分析灵敏度新时代为较好监视工具。
诊断结果的解释
存在HCV RNA缺乏抗-HCV抗体是强烈指示性急性丙型肝炎(AHC)，可能通过血清转换被验证(即，抗-HCV抗体的出现)少许天或周后(图4)。但是，对HCV RNA的存在在缺乏抗-HCV抗体，仍有其他可能性如，在免疫抑制患者，血液透析患者或无丙种球蛋白血症缺乏症受试者CHC感染。
抗-HCV和HCV RNA二者的存在不允许人们区别急性丙型肝炎 AHC和CHC的急性加重. 但是，临床症状开始后头8天内抗HCV抗体亲和力指数在鉴定实际AHC中可能有用。如果抗体测试阳性和HCV RNA 测试是阴性，这个结果表明HCV感染解决或AHC的低-水平病毒血症阶段。如HCV RNA分析是阴性和维持阴性6个月以上，那么个体是从过去HCV感染恢复。CHC被定义为持续存在HCV RNA共6个月以上。在有临床慢性肝病征象患者中，当抗-HCV抗体和HCV RNA都存在，CHC被肯定。
基因分型
不同的HCV基因型将导致对抗病毒治疗不同的反应。因此，对预测反应的可能性和确定最适宜治疗时间基因分型是重要的。
血清学方法：通过利用一个竞争性EIA检测抗体对HCV基因型-特异性表位可能确定HCV基因型。目前可得到的分析(Murex HCV血清分型1-6 HC02，Abbott Laboratories，North Chicago，Illinois)可能鉴定6种HCV基因型(1-6)但，和提供解释结果在约90%慢性感染的免疫低下患者.
分子学技术：对HCV基因分型参比方法是核心/E1或NS5B区的基因组测序和随后的系统发育分析。但是，这个内部方法仅限于参考中心。HCV基因分型分析被批准对体外诊断使用也可得到商品。靶向5’UTR线性阵列HCV基因分型测试(Roche Molecular Systems)。这个分析是根据常规PCR扩增接着通过反向杂交至含特异性探针膜条。得到带条模式可以或肉眼解释或通过扫描仪读出。最近已开发靶向其他区域初5′UTR以外分析更好区分亚型1a和1b间。Versant HCV基因型2.0分析(Siemens)也是根据反相杂交和靶向5’ UTR和核心区。另一方面，Abbott实时HCV基因型Ⅱ(Abbott Molecular)靶向5’UTR和NS5B区。这个分析是根据一个单一步骤实时RT-PCR用标记的基因型-/亚型-特异性探针that 减少用扩增产物污染。

 
图4 对丙型肝炎病毒感染可能诊断结果。在高风险中个体，如，曾暴露于HCV的人；有谷丙转氨酶升高人们；免疫力低下人们。HCV：丙型肝炎病毒。
分型
HCV分型对流行病学研究是重要的，尤其是在爆发情况下，但不被任务是对干扰素-α和利巴韦林的治疗临床相关。但是，在DAAs时代分型可能是临床相关。例如，特拉匹韦，波普瑞韦，faldaprevir和simeprevir的3期研究对HCV-亚型1a比那些亚型1b显示较低的持久病毒学反应(SVR)率。
此外，BILB 1941，一个HCV NS5B非-核苷酸抑制剂，曾被显示在患者有亚型1b有比亚型1a患者更好抗病毒疗效。因此，在DAAs时代确定HCV亚型方法应是重要的。第二代线性探针分析，一种反相杂交分析使用靶向5’UTR和核心-编码区探针，在99%更多病例正确地鉴定HCV亚型1a和1b。因此，这个分析可被用于在临床试验和实践区分HCV亚型1a和1b。
对HCV-被感染患者筛选
按照WHO (www.who.int)，至80%的HCV-阳性患者不显示症状。因此，大多数丙型肝炎病毒感染的情况目前不能确诊。诊断HCV感染主要途径是筛选高风险组对抗-HCV抗体。人类是主要的HCV储藏库。HCV传播主要通过经皮直接接触血液。因此，对HCV感染最常见风险因子是有注射毒品史者和1992年前输血。对HCV感染较低常见风险因子人群是1992年7月有器官移植者，至1987年接受凝血因子浓缩物，一位HCV-被感染母亲出生者，和有慢性血液透析史者，鼻内使用非法药物，获取纹身，监禁，与一个HCV感染伴侣有性行为，针刺或其他粘膜暴露，有持续地ALT升高水平。
因此，WHO建议在有高HCV血清阳性率或有HCV风险暴露和/或行为史人群部分的个体，而不是在表现出有症状性疾病的时间进行抗-HCV EIA. 此外，建议血清阳性测试结果后直接地进行NATs对HCV RNA检测以确定一个HCV感染明确诊断(www.who.int)。美国疾病控制中心(CDC)自从1998年也曾建议筛选对HCV高风险个体。在2012年CDC进一步修订HCV筛选指导原则包括一个与风险因子无关的一次性HCV测试1945年至1965年期间出生美国居民。
治疗
有急性丙型肝炎人大约50%-80%将发生CHC感染，和他们的5%-25%在20-25年后被报道进展至硬化。有硬化人们是处在发展肝病以及HCC的终末期。对CHC抗病毒治疗的目的是停止疾病进程，预防硬化失代偿和减低HCC的风险。
但是，真正困难设计和进行临床试验提供相关这些结局直接证据(www.ahrq.gov)。SVR被定义为在完成治疗后至少 24周HCV RNA不能检测到水平。目前，SVR是成功治疗的主要终点和是伴随病毒的持久清除。CHC患者抗病毒治疗后有SVR比没有SVR患者有一个较低所有原因死亡率。因此，SVR是在临床试验中成功抗病毒治疗标准标记。
在2000s早期，聚乙二醇化干扰素加利巴韦林(PR)的联用称为标准抗-HCV治疗。但是，抗-HCV干扰素治疗是不理想因为它需要每周注射和是伴随许多全身性的副作用(如，流感样症状，疲乏，等). 因此，需要其它抗HCV治疗。
原则上，HCV生命周期的每一步骤，包括受体附着，内吞作用，脱壳，翻译，多聚蛋白加工，RNA复制，病毒颗粒组装，成熟和释放，可能是对新抗-HCV药一个靶点.
HCV生命周期了解中进展已导致许多高效耐受良好口服DAAs的发展。在 2011年美国 FDA批准第一个DAAs，(商品名Victrelis™) (www.fda.gov/ForConsumers/ByAudience/ForPatientAdvocates/ucm255413.htm)和特拉匹韦
(商品名Incivek®) (www.fda.gov/ForConsumers/ByAudience/ForPatientAdvocates/ucm256328.htm)，为慢性HCV基因型1感染的治疗(图1)。两个药物都被分类为 NS3/4A蛋白酶抑制剂，有一个较短治疗时间潜在优点(24至28 wk)与对基因型 1 感染标准PR治疗比较(48周)。任一药物与PR联用给药。
在2013年，FDA批准另一个NS3/4A蛋白酶抑制剂：simeprevir (http://www.olysio.com/)。HCV NS5B蛋白是一种必不可少酶(RNA-依赖RNA聚合酶)在HCV病毒复制和已是为抗病毒治疗寻找中一个主要靶点。在2013年，FDA批准索非布韦(一种NS5B的抑制剂)与利巴韦林联用为HCV基因型 2和3口服双药治疗，和为三药治疗与利巴韦林为未治疗过有HCV 基因型1和4 患者(图2)。索非布韦治疗方案持续12周为基因型 1，2和4，和24周为基因型3治疗。这是用以前治疗典型地一半时间。因此，至2013年12月，被许可治疗为HCV感染包括聚乙二醇化和标准干扰素α，利巴韦林，NS3/4A蛋白酶抑制剂，特拉匹韦和simeprevir;和NS5B核苷酸聚合酶抑制剂索非布韦。
没有考虑资源，WHO提供以下指导原则 (http://www.who.int/hiv/pub/hepatitis/hepatitis-c-guides)：
(1) 建议聚乙二醇化干扰素与利巴韦林联用为CHC治疗而不是标准非-聚乙二醇化干扰素与利巴韦林；
(2) 用DAAs特拉匹韦治疗或，与利巴韦林联用，被建议为基因型1慢性HCV感染而不是单独利巴韦林 ；
(3) 索非布韦，与利巴韦林有或无聚乙二醇化干扰素联用(取决于HCV基因型)，被推荐在基因型 1，2，3和4 HCV感染而不是单独利巴韦林(或对不能耐受干扰素人们无治疗)；和(4) Simeprevir，与利巴韦林联用给予，被推荐为有亚型1b HCV感染人们和对有亚型1a HCV感染无Q80K多态性人们而不是单独利巴韦林。虽然在最近将来将可得到无干扰素抗HCV治疗，在那之前，将仍需要聚乙二醇干扰素与或蛋白酶抑制剂simeprevir，或核苷酸类似物聚合酶抑制剂，索非布韦，为基因型1感染的治疗。对索非布韦和利巴韦林对有基因型3感染患者聚乙二醇干扰素也表现是有用辅助，尤其是有硬化患者。因此，对抗-HCV治疗含干扰素需要治疗前评估，包括 HCV基因型测定，肝病分期(如，纤维化)，精神状况评估(如，抑郁和自杀)，评估对酒精或物质使用疾病；依从性，评价对HIV共-感染，妊娠，对IL28B基因型测试，和同时药物情况(如，自身免疫疾病)。将仍核查对抗-HCV治疗含干扰素不良事件，包括贫血，中性粒细胞减少，皮疹和皮肤反应，肛门直肠体征和症状，尿酸升高，胆红素水平，等 (http://www.who.int)。
HCV耐药性被定义为在存在-HCV药病毒变异体的选择，减低药物抑制性活性的易感性。耐药性-关联变异体是 HCV复制期间天然产生的。
目前，没有商品可得到的分析检测抗病毒治疗前和后耐药病毒的存在[75]。核查的唯一方法是监视患者抗-HCV治疗期间是否HCV RNA反弹(从HCV RNA低谷增加超过10倍)。
治疗期间，应治疗周4，8 (与含方案)，12，和24 ，在治疗结束时，和治疗后24周进行NATs定量HCV RNA监视病毒滴度。病毒滴度的测定有助检测耐药性病毒和调整剂量和抗-HCV治疗的时间。
根据干扰素影响抗-HCV治疗疗效的因子被分为两类：病毒-相关和宿主-相关因子。病毒-相关因子包括HCV基因型，基线病毒负荷，和治疗时病毒学反应。宿主-相关因子包括年龄，性别，种族-民族，纤维化期，肥胖，肝脂肪变性，低密度脂蛋白胆固醇，胰岛素耐药性，和IL28B 基因多态性。特别是，IL28B基因多态性是伴随SVR。
因此，根据干扰素宿主遗传因素对决定抗-HCV治疗效应是重要的。根据无干扰素抗-HCV治疗在以后几年将显著地变化因正在迅速涉及治疗方案。
因此，有需要根据无干扰素DAAs治疗确定这些病毒-相关和宿主相关因子抗-HCV治疗疗效的影响。
在2014年初，曽发表几篇关于新颖DAAs的报告：
(1)联合simeprevir和索非布韦对有HCV基因型1患者有效和很好耐受；
(2)联合daclatasvir (NS5A复制复合物抑制剂)和asunaprevir (NS3/4A蛋白酶抑制剂)可被用作一种全-口服，无利巴韦林治疗选择对患者有 HCV亚型1b 感染，包括那些有硬化患者；
(3)与其他口服DAAs联用，dasabuvir (一种NS5B的非核苷酸抑制剂)在患者有HCV基因型1感染导致非常高SVR率(约95%)与良好耐受性和安全性；
(4) ABT-450的持续反应率，已知NS3/4A蛋白酶的强效抑制剂，加其他直接抗病毒药在未治疗过和经历治疗基因型1患者都达到90%-95%，和耐受性良好；
(5)在有HCV和HIV[96]共感染患者索非布韦也有效；
(6)索非布韦加利巴韦林实现高SVR率在患者有HCV基因型1感染，和在有HCV基因型 4，5或6感染患者也表现有效。口服索非布韦一般地被CHC患者很好耐受；
(7) Ombitasvir (一种HCV NS5A抑制剂)与其他口服DAAs联用，在有HCV基因型1感染患者实现非常高SVR率(约95%)与良好耐受性；和(8)在未治疗过和经历治疗患者 Daclatasvir和asunaprevir联用都导致一个非常高率的病毒根除，有一个SVR率80%-90%。在2014年10月，FDA批准Harvoni(ledipasvir和索非布韦)治疗慢性HCV基因型1感染 (http://www.fda.gov/NewsEvents/Newsroom/PressAnnouncements/ucm418365.htm). Ledipasvir是一个HCV NS5A蛋白的抑制剂(www.gilead.com)。Harvoni是第一被批准治疗慢性HCV基因型1感染和联用组合药丸。
不仅DAAs，靶向宿主药物[host-targeted agents,HTAs]作为抗-HCV治疗也被开发。靶向宿主药物[host-targeted agents,HTAs]通过与细胞因子相互作用阻断 HCV产生。因为它们靶向保守的宿主蛋白，不是可变异病毒蛋白，靶向宿主药物[HTAs] have the potential for 全基因型[pangenotypic]抗病毒活性和一个对耐药性高屏障。直至今日，只有两个靶向宿主药物[HTAs]已到达临床试验，包括特异性抑制剂对亲环素一种肽基脯氨酰[peptidyl-prolyl]顺式/反式异构酶活性和microRNA-122的拮抗剂。
DAAs和/或HTAs进入临床试验的步伐是惊人的。DAAs的最佳组合(和/或靶向宿主药物[HTAs])效力最大化，耐药性最小化，和将很快可得到限制毒性。一旦DAA治疗组合是可得到。聚乙二醇干扰素将起更小和更小作用。的确，在它们抢救耗尽T细胞对HCV清除的能力DAAs胜过[trump]干扰素-α。从2015，将得到有短治疗时间和较少副作用无干扰素抗-HCV方案。但是，由于DAAs的高费用聚乙二醇干扰素可能仍有作用在资源-受限制地区。抗-HCV治疗后CHC患者实现一个SVR表现为与那些非-反应者比较减低所有原因死亡率> 50%。但是，在如此一个非随机临床试验，通过参数结局的改善可能是偏倚，例如反应者的良好的健康条件。的确，曾被报道有些实现SVRs的患者仍继续发展为终末期肝病。因此，其中治愈完全由SVR的概念可能并不总是正确的。
实际上，尽管利巴韦林改善SVR，没有证据表明有益地影响患者的相关成果，如死亡率和肝发病率。
因此，对患者-相关结局更好是记住SVR不会作为替代性指标。
用新的全-口服，无干扰素方案在以后几年内对HCV感染治愈率预计超过95%。但是，由于药物耐药性，对某些 HCV基因型次优活性和极高费用，并非所有患者可被治愈。 目前，对 HCV感染不能得到有效疫苗。因此，在对HCV感染的斗争中一个有效的预防性疫苗将是下一个挑战。