大量研究表明，老年冠状动脉综合征（ACS）患者冠脉内血栓形成的发生率约为80%~85% ，血小板活性异常增高是血栓形成重要的病理生理基础。ACS患者冠脉内皮细胞受损伤后，血小板激活导致血小板黏附、聚集、血栓形成。蛋白激酶B ( PKB )是一种丝氨酸／苏氨酸类蛋白激酶，在血小板聚集中起十分重要的作用，可能有维持血小板活化的功能,但目前国内有关PKB 的研究资料不多，应用药物干预PKB功能的研究亦少见报道。

  本研究旨在通过观察老年ACS患者用复方丹参滴丸治疗前后PKB活性的变化，探讨复方丹参滴丸对血小板功能的影响，为抗血小板治疗提供新的理论基础。

  资料与方法

  1.病例选择

  2004 年6 月至2005 年3 月入本院治疗的老年ACS 患者48 例，其中男性27 例，女性21 例，年龄67~75 岁，平均（70.4±5.6）岁。ACS诊断标准按美国心脏病学会（ACC）、美国心脏学会（AHA）制定的标准。

  48 例患者被随机分为两组，复方丹参滴丸（CRS） 组26 例，阿司匹林（AS）组22 例。在常规抗凝治疗（静脉持续泵入肝素钠1000 U/h）的同时接受抗血小板治疗，即CRS组接受复方丹参滴丸（天津天士力制药集团有限公司） 30粒/天口服；AS 组接受阿司匹林（德国拜耳公司，拜阿斯匹灵）300 mg/d口服。各组年龄、发病时间均无统计学差异（P＞0.05）。26 例健康老年人作为对照组(NC组)，男性17 例，女性9 例，平均年龄（67.5±6.9）岁，均为本院健康查体者，除外冠心病、糖尿病、高血压、血液病及肾病等病史。参试者检查前2周内未服用影响血小板功能的药物。

  2.血样本采集和测定

  治疗组于用药前10 min 及用药后3.5 h 、6 h 、24 h 分别采静脉血15 ml ，对照组清晨空腹采静脉血15 ml ，测定两组血小板聚集率和PKB活性。应用北京普利生BY-NJ2四通道血小板聚集仪，用比浊法测定血小板最大聚集率。诱导剂二磷酸腺苷（ADP）(由Sigma 公司提供)，终浓度为4.0 μmol/L 。

  PKB 活性测定：以HistoneH2B 为底物，反应总体积为50 μl。30 ℃ 反应10 min 点样、烤干，测定放射活性数。酶活性表示为30 ℃时每毫克蛋白质每分钟催化多少（pmol）γ-32P掺入底物蛋白。参考Lowrry 法进行蛋白定量测定。

  3. 统计学处理

  数据以x±s 表示，组间比较用t 检验。

  结果

  1. 所有ACS患者血小板最大聚集率均明显增加，与NC 组相比有显著差异（P<0.01）。口服CRS、AS 后3.5 h血小板最大聚集率均较用药前明显降低（P<0.01)，6 h下降最明显，但24 h 时CRS 对血小板聚集仍有较强的抑制作用；而AS 对血小板聚集的抑制作用基本消失（P>0.05）。结果见表1。

  2. ACS患者血小板胞膜PKB 表达较NC 组明显增高（P<0.01)，而胞浆PKB 表达则显著降低（P<0.01)。口服CRS 6 h 后患者血小板胞膜PKB 活性较用药前明显下降（P<0.01) ；而胞浆PKB 表达则已明显升高；6 h 时AS 组两指标虽有所变化，但用药前后比较无显著差异。24 h 时CRS 组患者血小板PKB 活性与用药前比较无显著差异（P>0.05）。结果见表2。

  表1 CRS、AS 对血小板聚集率的影响（%，x±s）

 讨论

  ACS是包括心绞痛和急性心肌梗死的临床症候群，常导致猝死等严重后果。其血管病理基础是动脉粥样硬化斑块破裂，局部伴有血栓形成或血小板活化等不稳定因素，因此易发展成血管闭塞，引发严重临床心脏事件甚至心肌梗死或猝死。

  血小板活化在ACS 的病理生理过程中发挥重要作用。PKB 的活性变化是导致血小板聚集及维持其活化状态的重要基础，测定PKB 的活性可反映血小板的活化程度及功能状态。

  本试验中所有老年ACS 患者血小板最大聚集率均明显增加（P＜0.01) ；血小板胞膜PKB 表达明显增高（P<0. 01)；而胞浆PKB 表达则显著降低（P<0.01)，三者与对照组相比均有显著差异。

  PKB 在老年ACS 患者体内血小板胞膜和胞浆的不同变化，是导致血小板膜磷酸化、胞膜损害、血小板活性物质释放、加重血小板黏附聚集的关键步骤。说明在老年ACS 患者体内血小板处于高度活化状态。因此，应用有效的抗血小板药物治疗对控制患者病情及预防并发症十分重要。

  CRS通过抑制血小板内磷酸二酯酶的活性，使cAMP 增加，在抑制血小板聚集的同时，还能抑制血栓烷素A2 的产生，具有扩张血管的作用。试验表明，口服CRS、AS后3.5 h 血小板最大聚集率均较用药前明显降低（P<0.01) , 6 h 时下降最明显，但24 h 时CRS 对血小板聚集仍有较强的抑制作用，而AS 对血小板聚集的抑制作用基本消失（P>0.05）。

  有文献报告，应用肝素和阿司匹林6 h 后，体内达到最大抗凝效果，本试验中受试者口服CRS 6 h 后，ACS 组患者血小板胞膜PKB 活性较用药前明显下降（P<0.01) ；而胞浆PKB 表达则已明显升高；6 h 时AS 组两项指标虽有所变化，但用药前后比较无显著差异。提示普通抗凝剂和AS 的应用并不能有效地抑制血小板活化，老年ACS 患者体内仍存在血小板的高度激活。

  CRS 不仅对血小板最大聚集率的抑制作用时间长于AS ，而且对PKB 亦能够有效抑制，这种作用在6 h 达到高峰，于24 h 消失。CRS 通过PKB 途径抑制血小板活化的机制还有待于今后进一步研究证实。

  结论

 老年ACS患者体内血小板处于活化状态，复方丹参滴丸能有效抑制血小板活化，作用优于AS,为抗血小板治疗提供了新的理论基础。