小鼠纤维介素基因shRNA表达质粒的构建及体外RNA干扰研究
湖北武汉华中科技大学同济医学院附属同济医院(430030)
汪之沫 宁 琴 罗小平
纤维介素蛋白(fibrinogen-like protein 2,fg12)又称fg12凝血酶原酶,是新近发现的一种凝血因子,它通过直接激活凝血酶原启动凝血过程。fg12凝血酶原酶最初是在感染鼠3型肝炎病毒(murine hetatitis virus strain-3,MHV-3)的小鼠体内发现的,随后又观察到该基因及其编码的fg12凝血酶的高表达与人类重症型肝炎的发生有关。对fg12进行基因干预研究,将为进一步地探索重症肝炎基因治疗奠定基础。
RNA干扰(RNA interference,RNA)是指特异性针对目标基因的同源双链RNA(double-strain RNA,dsRNA)的导入引起目标基因不表达或减效表达,具有高效、特异、快速等优点,应用前景广阔。本研究采用了一种独特的方法构建了针对小鼠fg12(mfg12)基因的小发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)表达载体,将其转染到CHO和Hela细胞,分析了对mfg12基因表达的干预效果。