日达仙治疗重型肝炎的免疫调节研究

从免疫调节角度来看，重型肝炎时肝细胞大量坏死的机理可能有两方面：①通过外源或肠源性内毒索来刺激肿瘤坏死因子(TNF)的产生，在病毒感染的基础上，TNF诱发一系列炎症性细胞因子的连锁反应；②通过CDt诱导组织相关抗原I型的免疫反应。目前重型肝炎的免疫调控治疗就是应用免疫调节剂来减轻上述的免疫反应以达到阻断肝细胞坏死的过程。我科应用化学合成内含28个氨基酸的胸腺制剂——日达仙(Thymosina。简称Ta。)治疗18例重型病毒性肝炎，取得较好的效果；并在治疗前、后检测一系列细胞因子，以探讨药物的作用机理，现报道如下。

1材料与方法

1．1病例选择按1995年全国肝炎会议标准，选取重型肝炎18例，其中男15例，女3例；年龄25～6O岁。其中急性重型1例，亚急性重型6例，慢性重型11例。

1．2治疗方法在一般综合治疗(包括血浆、白蛋白及对症治疗)的基础上加用Ta。1．6mg，隔日1次，皮下注射，28天为1个疗程。1．3实验室检查

1．3．1治疗前、后用酶联免疫吸附法(EIISA)检测II一2R、II一4、II一6、TNF。实验试剂由美国Endogen公司提供。

1．3．2用链菌素亲生物素过氧化酶连接法检测T细胞亚群(CD3+、CD$、CD+)。实验试剂由美国Zymed公司提供。

1．3．3用合成基质偶氮显色法检测内毒素水平。实验试剂由上海市医学化验所提供。

2结果

2．118例重型肝炎中12例存活，存活率66，死亡6例，3例死于肝肾综合征，1例合并胰腺炎和原发性腹膜炎，2例死于消化道大出血。

2．2治疗前T细胞亚群呈现出CDg升高，CD稍降低；血清内毒素水平明显增高；炎性细胞因子(TNF、II一2R、II一6)均增高。经Ta。处理后CD：明显降低，CD均有回升；血清内毒素水平、炎性细胞因子均明显下降，除CD的变化无显著差异性外(P>0．05)其余均有显著差异性(P<0．01)。

3讨论

在病毒性肝炎病人的肝组织碎屑样坏死区内浸润的淋巴细胞周围，发现有凋亡小体，在这些凋亡早期的肝细胞中，有淋巴细胞紧紧地吸附在其表面，经细胞表型鉴证，这些淋巴细胞主要是CD+CTIl1]。Ando在重型肝炎的动物实验中也证实了导致大量肝细胞坏死的细胞免疫中，主要是由CD+CTL所致L2]。CD；细胞是通过组织相关抗原I型免疫反应导致肝细胞损伤[3]。此类损伤较CD：介导的损伤更明显，我们的实验报告中也证明：在肝炎活动期，转氨酶增高l4]和重型肝炎时周围血的淋巴细胞的改变也呈现出CD增高，说明CD+在重型肝炎时肝细胞大量坏死中起重要的作用。

Ta。在体内外实验中均证实具有免疫调节作用，并揭示出其治疗的潜力。在老年小鼠体内，Ta有促进细胞因子分泌和细胞因子受体表达的作用Ls]。0hta报告Ta。可增强骨髓细胞的集落形成能力[6]。还有报告Ta。可增强发育中的淋巴细胞拮抗凋亡的能力L7j。在我们的实验中也证实：经Ta。处理后，病人周围血中的淋巴细胞呈现出CD；降低，CD+升高。Ta。能改变重型肝炎患者的T细胞亚群的比例，减轻CD+导致的肝细胞坏死程度，对提高重型肝炎的存活率是有帮助的。

重型肝炎时，另一个引起肝细胞大量坏死的重要因素是肿瘤坏死因子(TNF)。TNF的增高与凝血酶原活动度、胆红素有关。在病毒感染情况下，TNF可诱导一系列的炎症性细胞因子(II一1、II一2R、II一6)的连锁反应。这些炎症性细胞因子可刺激体内产生内源性丝氨酸类蛋白酶，对肝细胞产生损伤l8]。在肝病时，肝细胞代谢和蛋白合成障碍，细胞因子的毒性作用更为明显j。

细菌产生的内毒素是多种细胞因子的诱生剂，它可刺激II一1、II一6、TNF的分泌[】。内毒素加重肝脏损伤是通过TNF来介导的。内毒素和TNF既可以作为致敏剂，也可以作为激发剂诱导Schwrtzman反应，造成大量肝细胞坏死。在重型肝炎时，网状内皮系统功能低下，不能清除来自肠道的内毒素，以及机体的抵抗能力低下，容易招致细菌感染。因此，重型肝炎常产生高内毒素血症。

Francesco在吗啡处理的鼠模型中证实：TQl能促进中性粒细胞和NK细胞的复苏，从而提高抗真菌药物的疗效ll。Ta。尚能增强机体的抗感染能力。鼠类动物在感染单纯疱疹病毒前后分别给予注射Ta。，可提高感染小鼠的生存率ll。在相关的研究中，Ta。可降低免疫抑制小鼠对单核细胞增多性李氏菌、白色念珠菌和绿脓杆菌的感染率L1。Golstein实验中证实：Ta能降低内毒素血症和鼠内II一1、TNF等炎症性细胞因子的活性。我们的实验也证实：重型肝炎时，治疗前血中内毒素、TNF、II一2R、II一6等水平均增高，经TQ。处理后它们的活性均降低。说明TQ。是一种良好的抗炎因子，能降低重型肝炎时的内毒素水平，抑制TNF、II一6等炎性细胞因子的活性，减轻肝脏损伤的程度。II一4是一种抗炎性因子，它能抑制单核巨噬细胞分泌II一1、II一6、II一8、TNF和自由基Ll。重型肝炎时II一4水平和预后有关ll。我们的实验显示，重型肝炎时，II一4低下，经TQ。处理后IL一4水平提升。

综上所述，重型肝炎时，CD+数量增加，诱发组织相关抗原I型免疫反应，造成肝细胞凋亡。血清内毒素水平和TNF增加，诱发一系列炎症性细胞因子的连锁反应，造成大量肝细胞坏死。Ta。是一种强有力的免疫调节剂，它可降低CDt的数量，降低血清内毒素水平和TNF的活性，从而减轻炎症反应。Ta。也可以通过提升II一4的水平，抑制炎症性细胞因子对肝脏的破坏。