|
邱冬妮 孙旭 钟良 毛奇琦 孙大裕
【摘要】 目的 研究考来烯胺散促进肝内胆汁酸合成的基因凋节机制。方法 20只新西兰白兔分为考来烯胺散组(考来烯胺散每天1 g／kg，灌胃2周)和对照组，每组10只。测定两组2周后的血清胆固醇水平、总胆汁酸水平、肝组织胆固醇7a-羟化酶(CYP7A1)活性及其mRNA、法尼酯衍生物x受体(FXR)的靶基因短异源二聚体伴侣受体(SHP)mRNA和胆盐输出泉(BSEP)mRNA、低密度脂蛋白受体LDL一R)mRNA表达。结果 考来烯胺散组血清胆固醇水平较对照组下降10.25%，而血清总胆汁酸水平无明显改变；肝脏CYP7A1活性及其mRNA表达较对照组显著升高(P﹤0.05)，FXR靶基阂SHP mRNA和BSEP mPNA表达较对照组显著降低(P<0.05)，LDI -R mRNA 表达较对照组显著升高(P<0.05)。结论 考来烯胺散通过抑制回肠胆汁酸重吸收，减少回流人肝脏的胆汁酸(FXR配体)，从而抑制肝内FXR，激活CYP7AI．促进肝内胆固醇转化为胆汁酸，继而维持体内胆汁酸池稳定，降低血清胆固醇水平。
20世纪末，法尼酯衍生物x受体(FXR)被发现并证实为肝细胞核内生理性胆汁酸受体，在胆汁酸／胆固醇代谢和胆汁酸肠肝循环中起重要调节作用。胆固醇7a-羟化酶(CYP7A1)是胆固醇合成胆汁酸途径中的限速酶，FXR是CYP7A1强有力的转录抑制因子。短异源二聚体伴侣(SHP)和胆盐输出泵(BSEP)是FXR正向调节靶基因。约95%的胆汁酸在回肠被主动重吸收入肝脏。考来烯胺散为阴离子交换树脂，与胆汁酸形成络合物从粪便排出，可减少回肠胆汁酸重吸收。已有研究发现考来烯胺散可使血清胆固醇水平下降。本实验旨在验证考来烯胺散是否通过抑制FXR激活CYP7A1途径促进胆汁酸合成，从而降低血清胆固醇水平。 结 果 一、胆汁酸和胆固醇水平
两组白兔在考来烯胺散治疗过程中均未出现腹泻或便秘。2周后，考来烯胺散组和对照组血清总胆固醇水平分别为(2.83±0.07)mmol／L 和(3.22±0.13)mmol／L，考来烯胺散组较对照组下降11 (P<0.05)。考来烯胺散组血清胆汁酸水平为(7.21±0.27)umol／L，对照组为(7.23±0.37)umol／L ，组间差异无统计学意义(P>0.05)。 二、肝组织CYP7A1活性及其mRNA表达 2周后，考来烯胺散组和对照组肝组织CYP7A1活性分别为(1.350±0.206)ug／ml和(0.861±0.103)ug／ml(P<0.05)，考来烯胺散组较对照组升高57%。实时RT-PCR亦显示治疗组肝组织CYP7A1 mRNA的表达较对照组显著升高，相对值为对照组的3.7倍。 三、肝组织SHP mRNA和BSEP mRNA的表达 2周后实时RT-PCR显示，治疗组FXR靶基因SHP mRNA 和BSEP mRNA表达较对照组显著降低，SHP mRNA相对值较对照组下降89%，BSEP mRNA相对值较对照组下降61%，提示肝脏组织FXR活性受到抑制。 四、肝组织LDL—R mRNA 的表达 2周后，实时RT-PCR显示，考来烯胺散组LDL-R表达较对照组显著升高，LDL—R mRNA 相对值为对照组的3.1倍。 讨论 胆汁酸肠肝循环是维持体内胆汁酸池内稳态的重要环节，也是胆汁酸合成速率的重要机制。合成胆汁酸是胆固醇降解的主要通路，约50%的胆固醇在肝细胞内经限速酶CYP7A1经典途径合成初级胆汁酸，由BSEP泵入胆小管进入胆囊，再分泌入小肠，在肠道细菌的作用下转化为次级胆汁酸，在回肠被回肠刷状缘钠依赖性胆汁酸转化体（ASBT）主动重吸收如小肠黏膜细胞，与胆汁酸结合蛋白（IBABP）结合后经门静脉进入肝脏，再经BSEP泵入胆囊，形成胆汁分泌。肠道中95%的胆汁酸被重吸收，5%谁粪便排出，这部分丢失的胆汁酸有肝内胆固醇合成胆汁酸来补充，这就是经典的胆汁酸肠道循环。 FXR定位于哺乳动物的肝细胞核内，作为核胆汁酸受体，被会流入肝脏的胆汁酸激活，直接参与多种胆汁酸/胆固醇代谢和胆汁酸肠肝循环相关的基因的转录调控，已知的主要靶基因包括CYP7A1、SHP、BSEP、IBABP等。SHP是FXP正向调节靶基因，FXP被激活后，诱导SHP转录，继而使肝受体同源物-1(LRH-1,CYP7A1的重要转录调节因子)失活，从而抑制CYP7A1转录。 考来烯胺散在肠道与胆汁酸螯合，显著影响胆汁酸在回肠的重吸收。本实验结果表明，白兔回流入肝脏的胆汁酸（FXR激动性配体）大大减少，导致FXR失活，这一点可由肝组织中FXR靶基因SHP mRNA和BSEP mRNA的表达较对照组显著降低表现出来。FXR是CYP7A1强有力的转录抑制因子；FXR失活后，对CYP7A1的抑制作用解除。故本实验中考来烯胺散组肝组织CYP7A1 mRNA的表达较对照组显著升高，CYP7A1活性亦升高，从而使肝脏胆汁酸合成增加。肝细胞表面LDL受体是清除循环LDL的主要途径，其合成速率与细胞内胆固醇含量呈负相关。本实验结果显示，考来烯胺散组LDL-R的表达较对照组显著升高，说明增加的胆汁酸合成消耗了肝细胞内胆固醇，激活肝脏LDL受体，肝脏从循环中摄取胆固醇增加，从而使血清胆固醇水平下降。因此可以认为考来烯胺散降低血清胆固醇水平的机制可能是通过抑制FXR，继而激活CYP7A1刺激胆固醇转化为胆汁酸。除考来烯胺散外，已有报道回肠ASBT抑制剂SC-435也可激活CYP7A1，降低血清胆固醇水平，其机制也是促进胆汁酸合成。 本实验应用考来烯胺散后，尽管回肠胆汁酸重吸收显著减少，回流入肝脏的胆汁酸相应减少，但考来烯胺散组血清胆汁酸水平与对照组相比无明显变化。我们认为，虽然经肠道重吸收的胆汁酸减少，但肝内由胆固醇合成胆汁酸增多，弥补了由肠道丢失的胆汁酸，使胆汁酸肝肠循环建立新的平衡，保持了体内总胆汁酸池大小不变。类似由胆汁酸重吸收障碍激活肝脏胆汁酸合成，从而降低血清胆固醇水平的情况可见于回肠切除患者。 综上所述，回流入肝脏的胆汁酸能激活FXR，从而调节肝脏CYP7A1 的活性和胆汁酸的合成。考来烯胺散能减少回流入肝脏的胆汁酸，使肝脏FXR失活，继而解除对CYP7A1转录的抑制，促进肝内胆汁酸合成，从而维持体内胆汁酸池平衡。同时，胆汁酸合成增加消耗了体内胆固醇，使血清胆固醇水平下降。 本文节选自：《考来烯胺散对胆汁酸合成的基因调节作用》 邱冬妮 孙旭等 《肝脏》2008.13(5)：390-392 |
|
编号 |
药品名称 |
通用名 |
产地 |
规格 |
单位 |
参考价 |
| 15101 | 沁心青 | 考来烯胺散 | 南京厚生药业有限公司 | 5g:4g*12袋 | 盒 | 59 |