导读：华蟾素是由金蟾生化股份有限公司生产的抗癌产品，是干蟾皮的水化萃取制剂，1982年上市。
其主要的两种生物活性成分是：
① 吲哚类生物碱(蟾毒色胺、蟾毒色胺内盐，去羟基蟾毒色胺等)；
② 甾类强心苷(蟾蜍灵、华蟾蜍素、蟾蜍他灵等)。从70年代起的许多临床试验结果都显示华蟾素具有抗肿瘤作用，并且副作用轻微。此外，华蟾素辅助化疗或放疗应用，不仅能提高放化疗的疗效，还能减少其毒性反应¨ 。
华蟾素在中国上市后主要应用于肺癌和肝癌等恶性肿瘤的治疗，但由于上市时间较早，上市前没有进行过临床I期的研究，无法确定其最大耐受剂量。
在美国NCI(National Cancer Institiute)R2 1(CA108084)项目和科技部国际合作重点项目(2005DFA30130)的资助下，我院进行了华蟾素治疗肝癌、非小细胞肺癌和胰腺癌的临床I期研究，为华蟾素的临床用药剂量提供依据。
1 材料和方法
1．1 病例资料
1．1．1病例的入选标准
①病理学检查被确定为Ⅲ、Ⅳ期的肝细胞癌、非小细胞肺癌、胰腺癌，无有效治疗措施并且没有参加其他临床研究；
②期望生存期I>3个月，KPSI>60；
③签署知情同意书；
④必须有可测量的病灶；
⑤所有放化疗疗程结束后至少3周，且放化疗后不良反应均已恢复；若患者接受的治疗具有延迟毒性反应(如丝裂霉素、亚硝基脲)，则须至治疗结束后至少6周方可人组；
⑥骨髓造血功能：外周血中性粒细胞数>1500／ml，血小板数>75000／ml；
⑦肝功能：胆红素≤48~mol／L，ALT或AST<2．5倍正常值；
⑧ 肾功能：肌酐≤110~mol／L；
⑨心脏射血分数I>50％ ，没有充血l生心衰表现；
⑩如以前使用过华蟾素，与前次使用至少间隔1个月。
1．1．2排除标准
①中枢神经系统转移者；
②需要并且已经同意接受放化疗治疗者；
③心脏功能：纽约心脏协会分级大于Ⅱ级者；
④孕妇或哺乳期妇女；
⑤有外周神经症状者；
⑥感染需抗生素治疗者；
⑦对蟾蜍皮类药品有过敏史；
⑧ 正在服用强心药或抗心律失常药物者。
自2005年1月20日至2006年7月18日共人选患者15例。其中男性11例，女性4例。年龄35岁一70岁，平均55．8岁。包括原发性肝癌11例，胰腺癌2例和肺癌2例。
1．2 研究方法
1．2．1 药物来源 试验药品由安徽金蟾生化股份有限公司提供。华蟾素注射液为淡黄色液体，规格为：5 ml／支，批号：041104。
1．2．2 剂量递增及给药方法根据动物实验和目前临床使用经验，确定起始剂量为10ml／(m·d)(约等于说明书的推荐使用剂量20ml／d)。递增剂量为：第一剂量组10 ml／(m ·d)、第二剂量组20ml／m 、第三剂量组40 ml／m 、第四剂量组60 ml／m 、第五剂量组90 ml／m 、第六剂量组120 ml／m 。
华蟾素注射液冲人500ml生理盐水中，通过PICC(外周静脉穿刺中心静脉置管)静脉滴注，滴注时间大于2h，连续14d，21d为1疗程，如果没有出现剂量限制性毒性，治疗将持续2个疗程。2个疗程结束后，评价疗效，如为稳定或好转，将使用相同剂量进人维持治疗阶段，直至病灶进展。
1．2．3剂量限制性毒性(DLT)和最大耐受剂量(MTD)在本项研究中DLT是指任何评分为Ⅲ度或以上的(除脱发或评分为Ⅳ度但可用止吐药治愈的呕吐)毒性反应；评分为Ⅱ度的运动神经病变；血液学的剂量限制性毒性是在使用G—CSF的情况下发生的Ⅳ度的中性粒细胞减少，评分为Ⅲ度的中性粒细胞减少伴感染，评分为Ⅳ度的血小板减少；使用止泻药仍持续的Ⅲ度腹泻。
如在某一个剂量组没有出现DLT，则3名没有接受过治疗的患者将进入下一剂量组的试验。如3名患者中有1人在某一剂量组出现DLT，则这一组将增加3例患者。如在新增加的3人中没有再出现DLT，则可进人下一剂量组的试验。如在新增加的3人中再有1人出现DLT，此剂量组的上一个剂量将被认为是MTD。如在任何一个剂量组的3名患者中有2名出现DLT，此剂量组的上一个剂量将被认为是MTD。
1．3 观察项目 毒性反应按照CTCAE(commonterminologycriteriaforadverseevents)Version3．0的标准。观察指标包括血常规、尿常规、肝肾功能、电解质、心电图、同位素心功能检查。疗效评估包括影像学检查(包括胸片、CT／MRI)和肿瘤标志物检查。每日记录生命体征和症状，详细记录药物不良反应，并判断与试验药物之间的关系(有关、可能有关、可能无关、无关、不能判断)。
1．4 疗效评价标准根据可测量病灶的变化，评价疗效，疗效评价采用RECIST(response evaluation cri—teria in solid tumors)标准。
2 结 果
研究在第五剂量组(90ml／m)后，观察到的不良事件包括白细胞减少、血小板减少、血红蛋白减少、咯血、发热、乏力、心悸、胸闷、头晕、高血压、早搏、恶心、呕吐、便秘、腹泻、肝功能异常、胃纳下降、
肌肉酸痛、皮肤瘙痒和皮疹。其中和华蟾素有关或可能有关的不良反应有血液系统、消化系统、皮肤粘膜、心血管系统的不良反应以及其他的毒性反应。
2．1 血液系统反应有1例(第四剂量组)出现白细胞减少，为I度，在第l4天出现，持续7 d。1例(第二剂量组)出现血小板减少，为I度，在第6天出现，27 d后恢复。
2．2消化系统反应有1例(第二剂量组)出现便秘，为I度，用药后第1天出现，7d后恢复。1例(第五剂量组)出现腹泻，为I度，用药后第2天出现，持续至研究结束未缓解。1例(第一剂量组)出现食欲下降，为I度，用药后第l0天出现，30 d后恢复。
2．3皮肤粘膜反应有1例(第一剂量组)出现口腔溃疡，为Ⅱ度，用药后第1天出现，3d后恢复。2例(第五剂量组和第二剂量组)出现皮疹，分别为Ⅱ度和I度，分别为用药后第2l天出现，持续20 d和维持治疗中出现，持续1周。
2．4 心血管系统反应有1例(第一剂量组)出现早搏，为I度，用药后第20天出现，当天缓解。1例(第一剂量组)出现高血压，为Ⅱ度，用药后16 h出现，4 h后缓解。
2．5其他毒性反应有i例(第五剂量组)出现头晕，用药后第5天出现，持续，为I度。1例(第三剂量组)出现胸闷，为Ⅱ度，用药后第4天出现，30min后缓解。1例(第一剂量组)出现肌肉酸痛，为I度，用药后第50天(维持治疗中)出现，用药期问持续。
2．6 m／W度严重不良反应l5例患者中未发生与华蟾素有关或可能有关的Ⅲ／Ⅳ度不良反应。
2．7疗效评价l5例患者中，有l4例可以评价疗效。在第一剂量组，有1例肝癌病例肿瘤缩小20％并维持11个月。第二剂量组有2例为稳定，其中1例为肝癌伴肺转移，稳定维持8个月。第三剂量组有1例为稳定，第四剂量组有2例为稳定，第五剂量组有1例为稳定，其余8例患者为进展。
3 讨 论
很多基础研究证实华蟾素或其活性成分具有抗肿瘤的作用，包括抑制肿瘤细胞增殖、诱导其分化、促进其凋亡、提高机体免疫力等。目前国内外对华蟾素已知活性成分功能的研究主要以如何促进细胞凋亡为主，发现其强心甙类物质可通过对Na ／K ．ATP酶、拓扑异构酶Ⅱ、PKC同功酶活性以及ERK信号通路等的影响促进细胞凋亡_3 。我们的体外实验结果证明华蟾素在Ic 。剂量能抑制Panc．1(胰腺腺癌细胞)、HT29(结肠癌细胞)及Hep3B(肝癌细胞)的增殖。体内实验显示华蟾
素以l2．5 kg(生药剂量)的剂量用于小鼠，没有导致1例死亡且没有出现异常反应。
本研究中观察到的与华蟾素有关或可能有关的毒性反应有：血液系统反应(白细胞减少、血小板减少)、消化系统反应(便秘、腹泻、胃纳下降)、皮肤粘膜反应(口腔溃疡、皮疹)、心血管系统反应(高血压、心悸、早搏)和其他毒性反应(头晕、胸闷、肌肉酸痛)。其中无Ⅲ／Ⅳ度毒性反应，Ⅱ度毒性反应有皮疹、胸闷和高血压，其余均为I度。
另外，本研究中显示华蟾素的不良反应出现在各个剂量组。因为强心苷类物质是华蟾素中的主要成分之一，我们曾预计心脏毒性将是华蟾素的主要毒性。但是在研究中，最大剂量已经到达常规剂量的8倍，没有达到MTD剂量，没有出现DLT。出现的心脏不良反应为I度或Ⅱ度，并且出现在第一剂量组和第三剂量组。初步的研究结果说明机体对华蟾素静脉使用有良好的耐受性，不良反应较少。
在临床I期试验中，我们还将对病例血标本进行分析，期望了解华蟾素的体内代谢产物。在I期试验结束后，我们将在NCIUI9(CA12150301)项目的资助下，继续华蟾素的Ⅱ期临床试验，来确定其治疗恶性肿瘤的确切疗效。