用荧光定量聚合酶链反应（PCR）方法检测血清乙型肝炎病毒（HBV）DNA含量，对不同HBV感染状态患者血清HBV载量与丙氨酸氨基转移酶（ALT）水平的关系进行了探讨。
　　一、 资料与方法
　　1. 研究对象：134例HBV感染者均为我院住院及门诊患者，男78例，女56例，年龄18～65岁，平均年龄（35.9±23.4）岁。其中慢性乙型肝炎（CHB）患者84例（54例HBeAg阳性，30例HBeAg阴性），慢性无症状HBV携带者（ASC）50例（30例HBeAg阳性，20例HBeAg阴性）。诊断符合2000年病毒性肝炎防治方案[1]。用PCR专用管收集血清，置-28℃保存，统一检测。
　　2. 方法：(1)HBV DNA定量采用荧光定量PCR方法检测：纯化HBV DNA的不对称扩增引物及信号扩增引物由美国Biotronics公司提供；dNTP和Taq酶系美国Promega公司产品。不对称引物1为5′-TGCTCGTGTTACAGGCGGGGT-3′；引物2为5′-GAGGCATAGCAGCAGGATGAAGAG-3′，扩增产物为HBV S基因区编码的241bp片段；信号扩增引物为5′-TCGCTGGAAGTGTCTGCGGCGT-3′，不对称扩增产物内长度为64bp片段。(2)HBV血清标志物检测采用酶联免疫吸附法测定。(3)ALT测定采用全自动生化分析仪。
　　二、结果
　　1. 134例慢性HBV感染者的血清病毒载量：随着HBV感染的进展，HBV载量逐渐下降。HBeAg阳性的ASC患者血清病毒载量最高（109.66±4.3拷贝/ml），其次为HBeAg阳性的CHB患者（107.63±3.6拷贝/ml）、HBeAg阴性的CHB患者（105.45±2.5拷贝/ml），而HBeAg阴性的ASC病毒载量最低（103.86±2.3拷贝/ml）。在HBeAg阴性感染者中，肝炎患者的血清病毒载量显著高于无肝炎者（106.45±2.3拷贝/ml对104.87±4.6拷贝/ml，t＝13.1，P＜0.01）。90.0%（18/20）的HBeAg阴性ASC血清HBV载量低于105拷贝/ml。
　　2. 54例HBeAg阳性CHB患者的血清HBV载量、ALT水平及HBeAg半定量值：每月1次，连续观察2年以上。70.4%（38/54）患者血清病毒载量相对稳定，29.6%（16/54）患者病毒载量出现明显波动，与ALT波动不完全一致。有20.4%（11/54）的患者在观察过程中出现ALT明显升高（高于基线4倍以上），之后1～2个月血清病毒载量明显下降，3个月后病毒含量又逐渐上升到原来水平。有1例患者在观察第5个月出现ALT显著升高（大于1000U/L），之后HBV DNA水平明显下降，1个月后HBV DNA水平低于105拷贝/ml，2个月后ALT复常，随访半年后ALT正常，HBV DNA及HBeAg阴转。相关分析表明，HBeAg阳性的患者HBV DNA含量与ALT无明显相关,与HBeAg（P/N值）呈正相关（r＝0.45，P<0.05）。 
　　3. 30例HBeAg阴性感染者血清HBV载量与ALT水平显著正相关（r＝0.76，P<0.01），ALT升高时有80.0%（24/30）的患者血清HBV载量大于107拷贝/ml。
　　三、讨论
　　通过对HBV感染不同阶段的血清HBV载量进行分析，结果表明HBeAg阳性的ASC血清病毒载量最高，其次为HBeAg阳性的CHB患者、HBeAg阴性的CHB患者，而HBeAg阴性的ASC病毒载量最低。血清HBV载量与HBeAg（P/N）值呈正相关。动态观察患者血清病毒载量、ALT水平变化发现，大多数CHB患者血清病毒载量水平相对稳定，有时会出现波动，但与ALT水平波动不一致，部分患者ALT升高后HBV DNA水平有一过性下降，可能与机体免疫反应清除病毒有关。HBeAg阴性CHB患者的血清病毒载量与ALT水平有一定的关系[2]，而HBeAg阳性的患者HBV DNA含量与ALT无明显相关。