通心络明显促进外周血内皮祖细胞迁移和黏附 吴宗贵教授等的络病学基础与临床研究,比较了通心络对外周血内皮祖细胞迁移和黏附影响的量-效关系,以及100 μl浓度通心络对内皮祖细胞黏附影响的时-效关系。结果显示,不同浓度通心络均能提高内皮祖细胞迁移和黏附能力,且在100 μl浓度时效果最为显著(P<0.001),100 μl通心络呈时间依赖性地增强内皮祖细胞迁移和黏附能力(P<0.01)。

增强VEGF表达促进血管新生 重庆医科大学附属第一医院董为伟等对大脑中动脉闭塞 (MCAO)动物模型采用免疫组化图像分析比较结果显示(图8),假手术组神经元无血管内皮生长因子(VEGF)阳性表达, MCAO组缺血中心及周边区神经元VEGF呈弱阳性表达,通心络组呈强阳性表达。这提示,通心络通过增强VEGF表达促进急性脑梗后缺血区毛细血管新生。

增强缺血区VEGF的基因表达 河北医科大学的研究显示,通心络可促进缺血3天时大鼠脑组织半暗带VEGF表达,至缺血7天时VEGF表达仍持续升高,与模型组比较差异显著(P<0.01,P<0.05)。

促进鸡胚绒毛尿囊膜血管新生 王文健等的通心络促血管生成作用实验研究结果显示(图9),通心络可显著促进鸡胚绒毛尿囊一级(实验部位边缘1 mm范围内的血管)、二级血管(实验部位边缘5 mm范围内的血管)新生,与空白血清组比较差异显著(P<0.05),与贝复济(碱性成纤维细胞生长因子)组比较无显著差异(P>0.05)。

通心络的神经保护作用

脑保护,包括对脑组织结构及其功能的保护,是对脑梗死缺血区微血管保护的目的。

1.缺血性脑损伤的级联反应
脑缺血再灌注损伤的病理生理是一个多环节、 多因素、 多途径损伤的级联反应。其主要包括能量障碍和兴奋性氨基酸毒性(exitetoxicity),梗死周围去极化(peri-infarct depolarisation,PID)、炎症(inflammation)及细胞凋亡等机制。它们均由缺血引发,发生在4个不同时间点,彼此重叠并相互联系。因此,打破损伤的恶性循环,建立早期有效的再灌注和神经保护是临床治疗的主要目标。
2.通心络对缺血脑组织有明显保护作用

我们通过对大鼠局灶性缺血脑组织的组织形态学观察发现(图10),模型组脑组织细胞周围间隙增宽,血管周围神经细胞大小不一,毛细血管萎缩,神经细胞肿胀、排列紊乱、分布不均,细胞核深染固缩、部分胞质自溶、颗粒脱失,周边出现较大空晕,缺血脑组织形态改变严重。通心络小剂量组神经细胞缺血性改变减轻,细胞肿胀和血管、神经细胞周围间隙增宽较模型组减轻,但不及大剂量组的间质致密程度和坏死细胞数量减少显著。通心络大剂量组神经细胞缺血性改变明显减轻,细胞轻度肿胀和血管、神经细胞周围间隙增宽明显轻于缺血组,间质比较致密,坏死细胞数量减少。这提示,通心络对局灶性缺血脑组织有明显的保护作用。

1.保护脑梗死缺血区神经元超微结构

我们对实验性MCAO大鼠脑缺血的研究结果显示(图11,见1月10日C6版),与假手术组比较,模型组大鼠大量神经元受损,粗面内质网明显扩张、水肿、脱颗粒,线粒体肿胀,嵴断裂、溶解、消失,出现胞质空泡化等。通心络组可明显改善上述神经元超微结构变化,其中以大剂量组改善最为明显。

2. 增加缺血区Na+-K+-ATP酶活性

缺血、缺氧时,机体能量代谢依靠葡萄糖无氧酵解,产生大量乳酸,导致乳酸酸中毒和pH值降低。这时,脑内ATP 及其他高能磷酸键随之耗尽,同时依靠ATP运转的细胞钠泵也随之停止运转而产生细胞内水肿。

沈帆霞等的通心络对大鼠脑缺血-再灌注损伤作用机制研究显示,大鼠脑缺血2小时再灌注后1小时和1天时,通心络预防组和治疗组大鼠梗死侧皮质匀浆Na+-K+-ATP酶活性明显升高,与未用药组比较差异显著(P<0.05)。

3. 调节自由基代谢

自由基参与脑缺血再灌注损伤的发生, 既是神经元损伤的致命生化因素, 又是损伤级联反应的关键环节。清除自由基可减少急性脑梗死的缺血损伤,改善神经功能。

    图8 各组神经元血管内皮生长因子表达免疫组化图像
    通心络增强VEGF表达,促进卒中后缺血区毛细血管新生。MCAO:大脑中动脉闭塞,VEGF:血管内皮生长因子。

    图9 各组鸡胚绒毛尿囊膜血管新生图像
    通心络促进鸡胚绒毛尿囊膜血管新生的作用与空白血清组比较差异显著(P<0.05),与贝复济组比较无显著差异(P>0.05)。

    图10 各组大鼠局灶性缺血脑组织的组织形态学图像
    通心络对局灶性脑缺血脑组织有明显的保护作用